nitrílica ou luvas de látex
Quart porte jar
Bleach
água destilada
Murashige e Skoog (MS) em meio de uso único
pacotes de açúcar
Benzlaminopurine (BAP )
Planta conservantes Mistura (PPM)
bicarbonato de sódio
vinagre
papéis de pH
colher
frascos de 4 onças (20)
Microondas
Agar em pó bandas
borracha wrap ( 20)
Plastic
lâmina de barbear ou faca estéril
álcool
spray frasco
Médio jarra de vidro
pinças estéreis imagem Small placa
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1
Coloque em um par de luvas de látex ou borracha nitrílica . Encha uma garrafa de spray de três quartos cheio com álcool e ainda por cima com água destilada. Pulverizar o balcão em que você pretende trabalhar . Também pulverizar suas luvas e permitir que o ar seco .
2
Mergulhe uma jarra quart-sized em 10 por cento água sanitária por 10 minutos , em seguida, lave-o bem em água destilada.
3
Prepare o suporte de fábrica no frasco estéril. Combinar um pacote de meio MS , 2 colheres de sopa de açúcar , 1 mg de BAP 1 ml PPM e 1/2-quart de água destilada . Verificar o pH da solução com papéis de pH . Ajustar o pH entre 5,5 e 6,0 , utilizando bicarbonato de sódio para elevar o pH ou vinagre para derrubá-lo. Adicionar água destilada até que o recipiente atinge o nível máximo.
4
Adicione 3 colheres de sopa do meio preparado para cada frasco de 4 onças , para um total de 20 frascos. Adicione uma pitada de agar para cada frasco .
5
Cubra cada um dos frascos de plástico, feche-os com elásticos depois picar furos de ventilação no invólucro de plástico com uma lâmina estéril ou faca.
6
os frascos de microondas , durante um minuto , em seguida, agita-se o conteúdo de cada frasco com cuidado para garantir que o pó de agar é totalmente dissolvido e foi misturado com o meio preparado . Se o conteúdo não for homogêneo, micro-los novamente em rajadas de 30 segundos até que o pó de ágar se dissolva.
7
Encha uma jarra de vidro médio, com 10 por cento lixívia. Após a pulverização seu material vegetal com 70 por cento álcool e enxaguar em água destilada , molhe o material vegetal no frasco de 10 por cento água sanitária por 10 minutos.
8
Descarte a solução de água sanitária e, com a mesmo pote , deixe o material vegetal de molho em água destilada por cinco minutos. Troque a água depois de um minuto e novamente após três minutos para garantir a água sanitária é lavado.
9
Lave uma pequena placa com 70 por cento álcool e deixe-a secar ao ar . Mova o material vegetal a partir da lavagem com água para a placa estéril com pinças estéreis , em seguida, cortar o material vegetal em pedaços pequenos com a pinça e estéril lâmina de barbear ou utilitário faca.
10
Coloque um pedaço de planta de material em cada um dos pequenos frascos com o meio de agar vegetal .
11
Deixar os frascos em uma estufa ou sob uma luz de crescimento durante 16 horas em cada dia . Depois de quatro a cinco semanas , os pequenos brotos brotarão do material vegetal. Estas pequenas plantas podem ser transferidos para discos de crescimento, solo rico em vitamina ou um segundo meio de crescimento em ágar antes de ser replantadas em vasos ou no jardim.
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